医护网

本人甲状腺髓样癌的实验文章

RHOA/ROCK-2信号通路在甲状腺髓样癌中的表达及意义 汪颖厚（1.中国人民解放军第202医院普通外科） 甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma, MTC)是甲状腺癌中比较少见的类型，约占所有甲状腺恶性肿瘤的5%~10%[1]，属中度恶性甲状腺癌。MTC具有多灶性，淋巴结转移出现较早，且有遗传倾向，预后一般[2]。近年来甲状腺癌发病率迅速增加，MTC的发病率也随之升高[3]，但导致其发生发展的具体机制目前尚未明确。研究表明，RET和RAS原癌基因突变可导致甲状腺滤泡旁C细胞内外区蛋白构象的改变，诱导细胞增生过度而发生恶变，引发MTC[4]。而细胞的恶性增殖与多种信号通路的异常激活密切相关。RHOA/ROCK-2信号通路受多种上游因子的调控，通过调节其下游NFκB的转录活性，在众多生理及病理过程中发挥作用，尤其在细胞的增殖、骨架重排、迁移和代谢以及血管重塑等方面起着关键作用[5，6]。实验证明，RHOA、ROCK-2蛋白在多种恶性肿瘤中存在过表达，并在其发生、发展及侵袭过程中起重要作用[7]。然而，RHOA/ROCK-2在MTC中的表达及作用目前鲜有报道。本文拟检测RHOA、ROCK-2蛋白在MTC中的表达水平，旨在探讨 RHOA/ROCK-2信号通路是否与MTC的发生发展存在相关性。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 标本来源及一般资料：收集中国人民解放军第202医院及中国医科大学附属第一医院2008年至2012年术后病理确诊为MTC的石蜡样本30例，包括癌组织及癌旁组织。30例石蜡样本中，男15例，女15例；年龄25~74岁，中位年龄57岁。依据2013年NCCN标准临床分期：Ⅰ期7例，Ⅱ期6例，Ⅲ期6例，Ⅳ期11例。有淋巴结转移者17例，无淋巴结转移者13例。 1.1.2 主要试剂：RHOA、ROCK-2多克隆抗体（Santa Cruz公司，美国）均为大鼠抗人抗体，兔抗大鼠二抗（北京中杉金桥公司）；SP法免疫组织化学试剂盒、DAB显色液（福州迈新公司）。 1.2 方法 组织形态学检查：取标本中段4 μm切片，行HE 染色及免疫组织化学染色（RHOA抗体稀释比例为1︰100，ROCK-2抗体稀释比例为1︰400）。奥林巴斯AX70U、BX61+DP71成像系统采集图像，在高倍镜下随机计数5个视野，以细胞质呈棕黄色为阳性，计算阳性细胞率，以无阳性细胞或阳性细胞＜10%为阴性（－），阳性细胞≥10%为阳性（＋）。 1.3 统计学分析 采用SPSS17.0统计软件进行数据分析。数据以±s表示。采用X2检验进行显著性分析，P